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可靠,易用,高產(chǎn)!大規(guī)模細胞培養(yǎng)就選它!

2024/03/21

細胞工廠是大規(guī)模培養(yǎng)貼壁細胞的便捷方案。其廣泛用于疫苗、干細胞,293細胞培養(yǎng)等領(lǐng)域。隨著生物制品的發(fā)展,法規(guī)對細胞工廠培養(yǎng)細胞的密閉問題提出了嚴格的要求。本期將從細胞工廠產(chǎn)品,密閉系統(tǒng)應(yīng)用和自動化生產(chǎn)等方面,對細胞工廠進行具體介紹。


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1.細胞工廠

一個典型的細胞培養(yǎng)過程從細胞解凍復蘇開始,隨后通過連續(xù)傳代培養(yǎng)對細胞進行擴增。當細胞培養(yǎng)體積和細胞密度達到預定標準時,細胞將轉(zhuǎn)入到生物反應(yīng)器中繼續(xù)生長并表達產(chǎn)物。

當前大規(guī)模細胞培養(yǎng)可能面臨的一些挑戰(zhàn):

01.轉(zhuǎn)瓶

轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)結(jié)構(gòu)簡單,技術(shù)成熟,擴增只需加轉(zhuǎn)瓶數(shù)量等,但占地空間大,勞動強度大,產(chǎn)率低,細胞生長密度低,瓶間差異較難控制等,因而難以產(chǎn)業(yè)化或規(guī)模化生產(chǎn)。


02.生物反應(yīng)器

生物反應(yīng)器中大大提高細胞產(chǎn)率,減小占地面積,操作方便,重復使用;但剪切力會降低細胞的活率,并且微載體與細胞分離困難,細胞聚團現(xiàn)象嚴重,在擴大到一定規(guī)模時很難再繼續(xù)放大,因而限制了該技術(shù)應(yīng)用的范圍。


03.傳統(tǒng)細胞庫

傳統(tǒng)的細胞庫保存細胞時,凍存管內(nèi)細胞數(shù)量較少,細胞在放大過程中耗時較長。生產(chǎn)用生物反應(yīng)器體積非常大,需要許多中間型號的培養(yǎng)設(shè)備來將種子細胞按比例放大,這將導致需要更長的放大培養(yǎng)時間,并使情況變得更加復雜。


04.細胞工廠為細胞擴大培養(yǎng)提供了一種新選擇

細胞工廠是一種設(shè)計精巧的細胞培養(yǎng)裝置,適合于貼壁細胞培養(yǎng),線性放大不會改變細胞生長的動力學條件。有限的空間內(nèi)利用了大限度的培養(yǎng)面積,節(jié)省了大量的廠房空間,低成本實現(xiàn)擴大產(chǎn)能的目的。

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1個10層Genever細胞工廠

=85個T75細胞培養(yǎng)瓶

=36個T175細胞培養(yǎng)瓶

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對比可見40層細胞工廠的培養(yǎng)面積遠遠高于滾瓶,而占用面積卻比滾瓶小許多。


2.Genever細胞工廠產(chǎn)品完整介紹

基于細胞培養(yǎng)表面處理技術(shù)的研究與積累,Genever細胞工廠目前已廣泛應(yīng)用于Vero、MRC-5、2BS、293T、L-929和MSC等多種細胞的大規(guī)模培養(yǎng),適用于人和動物疫苗、治療性蛋白、細胞治療和基因治療產(chǎn)品的生產(chǎn)。目前可提供標準大口細胞工廠和預組裝細胞工廠兩種產(chǎn)品系統(tǒng)。


01.標準大口細胞工廠

標準大口細胞工廠采用大口設(shè)計,方便液體的快速灌注、排空和平衡,也為細胞培養(yǎng)提供更好的通氣條件。

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● 灌液口和主體一體注塑成型,使細胞工廠具有更好的密封性能及機械強度。

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(A/B/C為其他品牌,非一體注塑,易泄漏)


● 超聲焊接處理,不需要添加粘合劑,無雜質(zhì)引入;焊接點均勻無斷點;焊接時層與層之間不出現(xiàn)位移,公差小;獲得細胞培養(yǎng)性能的一致性。

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● Genever細胞工廠CF10——細胞培養(yǎng)所需氧氣量測試

為了測試Genever細胞工廠是否滿足細胞培養(yǎng)中的氧氣需求,我們共測試八種細胞(CHO,VERO,MDBK,MDCK,MRC-5,HEK-293,L-929,HEL-299)在Genever CF10 細胞工廠中的生長情況,在37℃孵房,無氣體交換的環(huán)境進行培養(yǎng)。結(jié)果顯示細胞生長密度均在95%以上。該實驗也進一步證實在細胞培養(yǎng)過程中對于氧氣的需求量是明顯低于大氣中氧分壓,細胞工廠氣相中氧氣也完全可以滿足需求,一般不需要特別進行氧氣供給。部分細胞生長情況可參考下圖。

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● 使用細胞培養(yǎng)專用的聚苯乙烯(美國藥典生物反應(yīng)性等級VI測試)制作;

● 無需其他配件,無需單獨購買通氣過濾器,即開即用,使用方便;

● 采用大口徑端口設(shè)計,更加方便快速地灌注和排空;

● 采用電暈處理方式,可在不同層及不同批次之間獲得一致的性能,并通過四種細胞培養(yǎng)的測試;

● 操作簡單更適合新手;

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02.預組裝細胞工廠

預組裝細胞工廠:符合CDE指導原則的封閉系統(tǒng)細胞工廠,提供快接頭和焊接管路兩種選擇,與對應(yīng)的細胞工廠管路配套。

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● 基于10層,40層細胞工廠定制;

● 進出液管路可選CPC連接器或者TPE焊接管路

● 使用經(jīng)過驗證的耐輻照碟式濾器

● 完全符合CDE指導原則的封閉系統(tǒng)細胞工廠

● 封閉系統(tǒng)液體傳輸管路,可靈活組裝;

● Genever預組裝細胞工廠——快速靈活完成通氣

在細胞大規(guī)模培養(yǎng)中,早期如何快速建立CO2培養(yǎng)環(huán)境及后期如何盡快排出新城代謝產(chǎn)生的CO2是維持細胞較好生長pH值的關(guān)鍵問題。Genever預組裝細胞工廠提供定制化靈活的傳輸管路,有效解決細胞工廠通氣問題。

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03 細胞工廠產(chǎn)品解決方案

① 我想使用細胞工廠養(yǎng)細胞,應(yīng)該選擇幾層的細胞工廠呢?

根據(jù)您單個批次需要獲得的細胞數(shù)量,可以計算出培養(yǎng)細胞所需的面積,進而確定細胞工廠的層數(shù)。

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② 有放大細胞培養(yǎng)工藝的需求,我該怎樣選擇合適的細胞工廠?

在生物制品開發(fā)過程中,細胞培養(yǎng)一般有以下幾個階段:

? 研究Research

? 工藝流程規(guī)模放大 Process scale-up

? 中試(非GMP)Pilot scale (non-GMP)

? GMP生產(chǎn) GMP production

? 為在大的生物反應(yīng)器中GMP生產(chǎn)制作細胞種子Seeding a larger vessel (e.g., bioreactor) for GMP production;

大家可以參照下圖細胞工廠選擇簡表進行簡單篩選。

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③ 我是頭次使用細胞工廠,想要對細胞培養(yǎng)的狀態(tài)進行觀察,請問如何操作?

對于1、2、4、10層的細胞工廠,您可以使用倒置顯微鏡進行觀察。通過倒置顯微鏡,您可以觀察到細胞工廠底層的細胞生長狀態(tài)。

如果您的倒置顯微鏡比較小,無法放置10層細胞工廠,或者您在進行40層細胞工廠的培養(yǎng)。您可以在培養(yǎng)10層或40層的同時,接種一個1層細胞工廠進行對照,根據(jù)1層的生長狀況對10、40層細胞工廠進行一個估計。


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