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Q1
PCR耗材為什么一般都是PP材質(zhì)的?
因為PCR/qPCR耗材通常會與試劑或樣品直接接觸,而聚丙烯(PP)材質(zhì)是生物學(xué)惰性材料,表面不易于粘附生物分子,且有著良好的化學(xué)耐性,及溫度耐受性(可高溫高壓滅菌 121 ℃ ,也可以承受熱循環(huán)過程中的溫度變化)。
Q2
不同體積的PCR管/板,該怎么選?
單管/聯(lián)管:0.5 mL,0.2 mL(標(biāo)準(zhǔn)),0.1 mL(低容)
96 孔板:0.2 mL(標(biāo)準(zhǔn)),0.1 mL(低容)
384 孔板:0.02 mL
PCR管的體積大多數(shù)都可以滿足PCR反應(yīng)的要求。但是在滿足實驗要求的基礎(chǔ)上,優(yōu)先選用低容管。低容耗材的設(shè)計最大程度減少了反應(yīng)體系上方的空間,降低了蒸發(fā)的影響并提高熱傳導(dǎo)率。
Q3
PCR管為什么有平蓋和凸蓋,該怎么選?
平蓋:可為qPCR提供精確的熒光信號傳遞,便于書寫標(biāo)記。
凸蓋:與PCR儀熱蓋接觸,減少壓力引起的反應(yīng)管變形,更好的防止液體蒸發(fā)。但會影響熒光信號傳遞,無法應(yīng)用于qPCR實驗。
Q4
不同顏色的 PCR 管/板,該怎么選?
對于普通的PCR反應(yīng)選用透明的就可以。在實時PCR反應(yīng)時,白管的靈敏度和一致性相對更高。白色管壁能夠阻止熒光穿過管壁和折射,進而防止熒光傳至加熱模塊,被模塊吸收或發(fā)生不一致反射等情況。相比于透明管,在白管的頂端能夠采集到更強,更聚焦的熒光信號。
Q5
PCR板/管材質(zhì)是厚點的穩(wěn)定性更好嗎?
不是的。PCR耗材的管壁厚度要均一,才能提供一致的熱傳導(dǎo)。超薄管壁較標(biāo)準(zhǔn)版薄50%,可進一步減少熱屏障,帶來更快更好的反應(yīng)效果。
Q6
96孔板,無裙邊和半裙邊,該怎么選呢?
裙邊的更多在于為工業(yè)化、自動化批量處理提供便利,與機械臂的結(jié)合。在常規(guī)科研實驗室中可能不太需要,使用無裙邊板即可。
無裙邊板:兼容大多數(shù)的PCR儀或qPCR儀,易于剪裁,但不適用于自動化應(yīng)用。
半裙邊板:可適配標(biāo)簽或應(yīng)用條碼,及自動化應(yīng)用,且有著較好的移液穩(wěn)定性。
Q7
96孔/384孔板,為什么有個切角呢?
切角:PCR板的切角位置選擇取決于適配儀器要求,便于定位。
PCR板選好后,還需選一張好的PCR膜來密封,才能保證獲得準(zhǔn)確可靠的PCR數(shù)據(jù),這對實時PCR非常重要!
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