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技術(shù)干貨 | Honest 細(xì)胞工廠通氣調(diào)節(jié)策略解析

2023/11/03

人體內(nèi)的氣體交換大家肯定不陌生,節(jié)假日跑到空氣清新的郊外吸吸氧,去環(huán)境優(yōu)美的度假區(qū)放松下;仿佛身體的每個(gè)細(xì)胞都活躍起來(lái),這個(gè)時(shí)刻人體不再只是一個(gè)整體,變成了細(xì)胞們的主場(chǎng);如果我們把人體的肺泡比做在培養(yǎng)瓶或者細(xì)胞工廠中培養(yǎng)的細(xì)胞,那么每個(gè)細(xì)胞的氣體交換將變的神秘而有趣,今天就由小編來(lái)簡(jiǎn)單解析下細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中通氣奧妙。


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在細(xì)胞培養(yǎng)中最常監(jiān)控的參數(shù)為pH值、溶解氧和CO2;其中最為關(guān)鍵的參數(shù)為pH值,因?yàn)樵诩?xì)胞的新陳代謝中酶的活性對(duì)pH值的變化非常敏感,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)最大程度取決于培養(yǎng)環(huán)境是否保持正確的pH值。


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一般細(xì)胞培養(yǎng)基的pH在7.0-7.4之間,是大部分細(xì)胞培養(yǎng)最適pH值。由于碳酸鹽pH緩沖系統(tǒng)是一種生理pH緩沖系統(tǒng)(它是人體血液中最重要的pH緩沖系統(tǒng)),所以大多數(shù)培養(yǎng)液用它來(lái)保持穩(wěn)定的pH。對(duì)大多數(shù)以碳酸鹽作為pH緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)液而言,為了維持穩(wěn)定的pH,培養(yǎng)箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間,以保持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳的濃度。同時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)的器皿需要一定程度的透氣,以便于氣體的交換。


在細(xì)胞培養(yǎng)早期,培養(yǎng)器皿如細(xì)胞工廠/T 瓶等氣相中需要提前充入適當(dāng)CO2以應(yīng)對(duì)早期細(xì)胞對(duì)于pH值的需求;而在培養(yǎng)中后期,細(xì)胞經(jīng)過(guò)新陳代謝產(chǎn)生大量的CO2釋放出來(lái),便會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基和氣象中CO2含量過(guò)高,如何及時(shí)排除CO2又是另一大難題。


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對(duì)于大規(guī)模生產(chǎn),細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)于O2的消耗速率很快。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,維持細(xì)胞正常生長(zhǎng)的表面氧分壓顯著低于大氣中氧分壓,細(xì)胞生長(zhǎng)的速度并不是與O2濃度成正比的,可參考下圖。

              Parrinello, S and Samper, E, Nature Cell Biol. Aug 2003, 5(8), 741-7



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為了測(cè)試Honest細(xì)胞工廠是否滿足細(xì)胞培養(yǎng)中的氧氣需求,我們共測(cè)試八種細(xì)胞(CHO,VERO,MDBK,MDCK,MRC-5,HEK-293,L-929,HEL-299)在Honest CF10 細(xì)胞工廠中的生長(zhǎng)情況,在37℃孵房,無(wú)氣體交換的環(huán)境進(jìn)行培養(yǎng)。結(jié)果顯示最終細(xì)胞生長(zhǎng)密度均在95%以上。該實(shí)驗(yàn)也進(jìn)一步證實(shí)在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中對(duì)于氧氣的需求量是明顯低于大氣中氧分壓,細(xì)胞工廠氣相中氧氣也完全可以滿足需求,一般不需要特別進(jìn)行氧氣供給。部分細(xì)胞生長(zhǎng)情況可參考下圖。


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在細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)中,早期如何快速建立CO2培養(yǎng)環(huán)境及后期如何盡快排出新城代謝產(chǎn)生的CO2是維持細(xì)胞最佳生長(zhǎng)pH值的關(guān)鍵問(wèn)題。Honest預(yù)組裝細(xì)胞工廠提供定制化靈活的傳輸管路,完美解決細(xì)胞工廠通氣問(wèn)題。

產(chǎn)品特點(diǎn)

? 基于10層,40層細(xì)胞工廠定制

? 進(jìn)出液管路可選CPC連接器或者TPE焊接管路

? 使用經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的耐輻照碟式濾器

? 完全符合CDE指導(dǎo)原則的封閉系統(tǒng)細(xì)胞工廠

? 封閉系統(tǒng)液體傳輸管路,可靈活組裝


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